Метод проточной цитометрии состоит в классификации клеток по параметрам, таким как способность к рассеиванию света и антигенные характеристики, и их дифференциальном подсчете.
Для этого клетки по одной пропускаются через ячейку, через которую проходит луч лазера. Измерение рассеяния света под разными углами дает информацию о размерах клетки и характеристиках ее органелл, а интенсивность флуоресценции (зависит от состава клеточной стенки и количества присоединившихся к клетке флуоресцирующих антител) позволяет определить популяционный состав образца).
Этот метод можно использовать для анализа клеток любого типа, но в клинической практике он чаще всего используется для исследования образцов крови. После настройки аппарата он может анализировать более 500 клеток в секунду.
Как работает проточный цитометр
Определение типа клеток
Проточный цитометр обычно измеряет несколько параметров каждой клетки, предоставляя информацию о ее размере и характеристиках.
Возможность дифференциации клеток по типам сильно увеличивается, если она проводится по двум параметрам.
Флуоресценция
Для дальнейшей сортировки используются флуоресцентные красители, связанные с антителами, распознающими специфические белки (антигены) на поверхности клетки. Эти вещества испускают свет с различной длиной волны и могут использоваться в различных комбинациях, позволяя идентифицировать до трех антигенов для каждой клетки.
Изолирование клеток
Новейшие приборы могут выделить из образца отдельную клеточную популяцию. Частицы выходят из камеры в поток, который затем разбивается на капли, двигающиеся с равными промежутками. Капли, содержащие нужные клетки, отклоняются электрическим полем высокой напряженности и собираются в приемник.
Тело человека. Снаружи и внутри. №55 2009